Неколку ензими кои вообичаено се користат во експериментите со PCR

Полимеразна верижна реакција, скратено какоPCRна англиски јазик, е техника на молекуларна биологија која се користи за засилување на специфични фрагменти на ДНК.Може да се смета како специјална репликација на ДНК надвор од телото, што во голема мера може да зголеми многу мала количина на ДНК.Во текот на целатаPCRпроцесот на реакција, една класа на супстанции игра витална улога - ензими.

1. Так ДНК

Во експериментите во раните денови наPCR, научниците користеле Ешерихија коли ДНК полимераза I, Но има проблем со овој ензим: тој треба да надополнува нов ензим секој пат кога се изведува циклус, што ги прави чекорите на операцијата малку комплицирани и тешко е целосно автоматски да се засилуваат.Овој проблем беше решен откако научниците случајно изолираа Taq DNA полимераза од Thermus aquaticus во 1988 година. Оттогаш, автоматското засилување на ДНК стана реалност.Откривањето на овој ензим, исто така, правиPCRтехнологија удобна, практична и универзална технологија.Во моментов, Taq DNA полимеразата е најчестата полимераза во ДНК комплетите.

2. PfuDNA

Како што споменавме погоре, Taq DNase има голема грешка, така што научниците ја модифицираа Taq DNA полимеразата до одреден степен со цел да избегнат неспецифично засилување поради неусогласеност, што резултира со неточни резултати од тестот.Но, модификацијата на Taq DNA полимеразата може да ја инхибира активноста на ДНК полимеразата на собна температура.PfuDNA полимеразата може добро да ги надомести горенаведените недостатоци на Taq DNA полимеразата, така што реакцијата на PCR може да се спроведе нормално, а стапката на успех на засилување на целниот ген може ефикасно да се подобри.

3. Обратна транскриптаза

Обратна транскриптаза е откриена во 1970 година. Овој ензим користи РНК како шаблон, dNTP како супстрат, го следи принципот на спарување на базите и синтетизира единечна нишка на ДНК комплементарна на шаблонот РНК во насока 5'-3'.Обратна транскриптаза е примарно зависна од активноста на ДНК полимеразата од шаблоните на ДНК или РНК и затоа нема 3'-5' егзонуклеазна активност.Сепак, има активност на RNase H, што ја ограничува должината на синтезата на реверзната транскриптаза до одреден степен.Поради ниската верност и термостабилноста на дивата реверзна транскриптаза, научниците исто така ја модифицираа.

ЗаPCRексперименти, главните потрошни материјали се: индивидуална PCR цевка, 4/8-лента PCR цевка, PCR плочи.

ЛабиоПотрошен материјал за PCRго имаат следновопредности:

ПЦР плочи: Широка компатибилност со термички циклуси;Висок контраст, лесна идентификација на бунарот;добро флуоресцентна рефлексија;добропренос на топлина;Сертифицирани DNase, RNase, DNA, PCR инхибитори и тестирани без пирогени.

Индивидуални ПЦР цевки: Отпорен на испарување; добропренос на топлина;одлична оптичка јасност; Сертифицирана DNase, RNase, ДНК, PCR инхибитори и тестирана без пироген.

ПЦР цевки со 4/8 ленти: Ултра тенки ѕидови;висока јасност;добра рефлексија на флуоресценција;може да се користи во фармацевтската индустрија, прехранбената индустрија и молекуларната биологија; висококвалитетен, девствен ПП материјал; Сертифицирана DNase, RNase, ДНК, PCR инхибитори и тестирани без пирогени.